環(huán)氧乙烷滅菌生物指示劑（枯草黑色變種芽孢菌片）

凡用環(huán)氧乙烷滅菌的一次性注射器等器材的滅菌效果檢測方法有生物指示劑檢測和環(huán)氧乙烷化學(xué)滅菌指示卡兩種方法。

環(huán)氧乙烷滅菌效果的生物指示劑為國際標(biāo)準(zhǔn)菌株枯草桿菌黑色變種芽孢(ATCC9372)。

特    性：

該菌為G蘭氏陽性桿菌，極易形成芽孢，芽孢位于菌體中央，不膨大。芽孢染色為孔雀綠著色。在瓊脂平皿菌落呈棕色并隨培養(yǎng)時間延長菌落有黑色素生成著色。

生物指示劑（ATCC9372）：                    染菌量：5×105－5×106cfu/片

抗力：流通蒸汽：100℃4min

環(huán)氧乙烷：600±30mg/L      溫度：54℃      相對濕度：60%±10%

                    存活時間≥7.8min                        死亡時間≤58min

                    D值為2.6－5.8min

使用方法：

        1、該芽孢菌片適用于環(huán)氧乙烷（包括微波、干熱）滅菌檢測。

        2、使用時將裝有菌片的小紙袋放在被滅菌的物品中心部位（每鍋放置菌片數(shù)按衛(wèi)生部規(guī)定）。

        3、滅菌后，在無菌操作下取出小紙袋中的菌片，投放到培養(yǎng)液中。同時將2片未經(jīng)滅菌的菌片分別投入2管培養(yǎng)液中作對照。

        4、37℃培養(yǎng)7天觀察結(jié)果，對照管呈渾濁；若滅菌后菌片培養(yǎng)液呈清亮、無渾濁，為陰性（－），表示滅菌徹底；如培養(yǎng)液呈渾濁，為陽性（+），表示滅菌不徹底。

        5、當(dāng)出現(xiàn)陽性結(jié)果后，為確定是否為滅菌后接種操作過程中污染其他菌種時，可在無菌室內(nèi)取0.2ml懸液接種營養(yǎng)瓊脂平板用無菌L棒涂抹均勻，置37℃培養(yǎng)24h后，涂片顯微鏡下觀察菌落形態(tài)或做進(jìn)一步試驗(yàn)。

培養(yǎng)液成份和配制方法：

      1、成        分：  牛肉膏5g、蛋白胨10g、氯化鈉5g、蒸餾水1000ml。

          2、配制方法：

          （1）把各種成分溶解后，調(diào)解pH7.0－7.2，搖勻；

          （2）每管分裝5ml，經(jīng)121℃20min滅菌后，放4℃冰箱內(nèi)保存，備用。

注意事項(xiàng)：

      1、本生物指示劑應(yīng)保存在4℃冰箱內(nèi)，避免其它因素影響。   

          2、本生物指示劑在檢驗(yàn)時可按衛(wèi)生部“消毒技術(shù)規(guī)范”有關(guān)規(guī)定進(jìn)行。